产品货号:
YTB3509
中文名称:
5×SDS-PAGE蛋白上样缓冲液(双染料)
英文名称:
5X Dual Color SDS-PAGE Protein Sample Loading Buffer
产品规格:
5mL|15mL
发货周期:
1~3天
产品价格:
询价
本制品是一种使用蓝色和红色染料、5倍浓缩的蛋白上样缓冲液。本制品含有SDS和DTT,可以用于常规的SDS-PAGE蛋白样品的上样。
除了染料不同外,本制品与以溴酚蓝为染料的常规SDS-PAGE蛋白上样缓冲液效果一致。用于常规的SDS-PAGE电泳时,本制品中蓝色染料的迁移率与溴酚蓝一致,红色染料的迁移速度和蓝色染料相近。Tris-Gly电泳体系中,在SDS-PAGE的胶浓度低于15%时,红色染料的迁移速度微快于蓝色染料,胶浓度高于15%时,红色染料的迁移速度微慢于蓝色染料。
本制品可以用于转膜后的泳道示踪:5×SDS-PAGE蛋白上样缓冲液(双染料)中含特殊的红色染料,该红色染料可随蛋白转印到PVDF或NC等印迹膜上,从而可以用于泳道位置的指示,便于剪膜等操作。使用本制品的电泳及转膜效果参见图1。
图1.5×SDS-PAGE蛋白上样缓冲液(双染料)用于PAGE预制胶(Tris-Gly,12%,10孔,货号:YTC0017)的电泳后的凝胶图(Gel after electrophoresis)、转膜后PVDF膜图(Blot)和转膜后凝胶图(Gel after transfer)。
组分 | 5mL | 15mL |
5×SDS-PAGE蛋白上样缓冲液(双染料) | 5×1mL | 15mL |
说明书 | 1份 | 1份 |
保存:-20℃,有效期1年。
- 本制品中含少量DTT,有轻微刺激性气味,但不含剧毒的巯基乙醇。
- 本制品必须完全溶解后再使用。
- 本制品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品。
- 在室温或不超过37℃的水浴中溶解5×SDS-PAGE蛋白上样缓冲液(双染料)。水浴溶解后立即室温存放,尽量避免长时间置于水浴中。使用完毕后置于-20℃保存。
- 按照每4μL蛋白样品加入1μL 5×SDS-PAGE蛋白上样缓冲液(双染料)的比例,混合蛋白样品和上样缓冲液。
- 本制品稀释至1X后也可以直接用于细胞或组织样品的裂解。
- 100℃或沸水浴加热3~5分钟,以充分变性蛋白。
- 如果起始时细胞或组织的用量较大,基因组DNA含量较高,煮沸3~5分钟后有可能仍然比较粘稠或者有粘稠状的半透明物体。此时需要再煮沸5~10分钟或者加入适量稀释成1×的双色蛋白上样缓冲液后再煮沸3~5分钟。充分煮沸后一方面可以使结合在基因组DNA上的蛋白充分释放,同时可导致基因组DNA的部分断裂从而使粘稠感消失,这样就不会影响后续的上样操作了。适当超声或使用1mL注射器反复抽吸也可以打断基因组DNA从而使粘稠感消失。
- 冷却到室温后,直接上样到SDS-PAGE胶加样孔内即可。
- 通常电泳至红色或蓝色染料到达胶的底端处附近即可停止电泳。
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